“雷鸟”染料法q PCR试剂盒
消除Realtime PCR的定量范围、特异性、成本等烦恼
高效率SYBR Green Realtime PCR Master Mix
THUNDERBIRD® SYBR® qPCR Mix
THUNDERBIRD® SYBR® qPCR Mix
| Code No. | 包装 | 价格 | 保存温度 | 说明书 |
|---|---|---|---|---|
| QPS-201 | 1.67ml×3支 | RMB 1,500 | -20℃ | 
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| QPS-201T | 1ml×1支 | RMB 325 | -20℃ |
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THUNDERBIRD® SYBR® qPCR Mix Without Rox
| Code No. | 包装 | 价格 | 保存温度 | |
|---|---|---|---|---|
| QPS-201(-) | 1.67ml×3支 | RMB 1,500 | -20℃ | - |
| QPS-201(-)T | 1ml×1支 | RMB 325 | -20℃ | - |
【产品用途】
相对定量进行基因表达分析
【产品说明】
THUNDERBIRD qPCR Mix是在Taq DNA polymerase基础上开发的高效率Realtime PCR用Master Mix（2×浓度）, 是Realtime PCR Master Mix系列的改良产品。 最适合用于以cDNA、病毒DNA为样品的Realtime PCR分析。本系列产品有TaqMan® Assay（Probe Assay）用及SYBR®Green I用两类试剂盒可供选择。本产品通过采用新的增强剂等手段，对组分进行了根本性的改良，使得反应特异性和PCR效率有了飞跃式的提升，从而可得到更广的可定量扩增区域（dynamic range），而且可适用于模块型及毛细管型等各类仪器。
【产品特征】
不同仪器的protocol: SYBR版 |
除适用于普通及高速的模块型(Block Type)仪器外，还适用于使用玻璃毛细管(Glass Capillary Type)的高速循环仪。由于另外添附了50× ROX reference dye，对于使用Passive Reference的仪器(如Applied Biosystems公司制造的仪器、Stratagene公司制造的仪器)，可根据各种仪器的特征把ROX调整到最适浓度。
●高速hot start
本产品采用了抗Taq聚合酶抗体的热启动系统。由于通过升温能使抗体迅速失活，因此预变性时间可以设定为很短。
【产品实验例】
SYBR® Green I检测体系的反应特异性比较
使用β-Actin cDNA的引物对，比较了各Realtime PCR试剂的反应特异性。引物对是能扩增人的β-Actin cDNA的引物，模板是使用本公司高性能的逆转录试剂「ReverTra Ace® qPCR RT Kit [Code No. FSQ-101]」合成的HeLa细胞Total RNA来源的cDNA，将cDNA作10倍的梯度稀释(4个梯度)，以no-template control(NTC)一起，分别作了复孔进行实验。(使用Roche Diagnostics LightCycler®1.1)
【参考文献】
1) R.M. de Breuil et al., PCR Methods Appl., 3 : 57-59 (1993)
2) P.M. Holland et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88 : 7276-7280 (1991)
【产品内容】
【QPS-101T,QPS-201T,QPS-201(-)T】
qPCR Mix1ml ×1支
50X ROX reference dye50μl
(50μl反应体系40次，或20μl体系100次)
【QPS-101,QPS-201,QPS-201(-)】
qPCR Mix1.67ml ×3支
50X ROX reference dye250μl
(50μl反应体系200次，或20μl体系500次)
【基本产品信息】
〈SYBR® Green I 法〉
灭菌水Xμl
qPCR Mix10μl
Forward Primer6pmoles
Reverse Primer6pmoles
DNA样品Yμl
50×ROX referencre dye0.4/0.04μl*
Total Volume20μl
*50×ROX reference dye，是对于使用 Passive Reference 的仪器（如Applied Biosystems 公司制造的仪器等），为校正各孔间的荧光强度及分注误差而使用。不用 Passive Reference 进行校正的仪器无需添加。
〈2步法〉
95℃ 20～60sec.
↓
95℃ 1～15sec
60℃ 30～60sec.
40 cycles
〈3步法〉
95℃ 20～60sec.
↓
95℃ 1～15sec
55～65℃ 5～30sec.
72℃ 30～60sec.
40 cycles
※退火温度，请在引物的Tm~Tm-5℃的范围内设定。
※目的片段在 300bp 以下时，延伸时间 30 秒即可进行充分的反应。但一部分仪器为了能够测定到稳定的荧光，延伸时间需大于 30 秒。扩增曲线散乱，或各孔间的差异较大时，请设定较长的延伸时间（45-60 秒）。
LightCycler® 是Idaho Technology Inc.的商标。
SYBR® 是Molecular Probes Inc.注册的商标。
TaqMan® 是Roche Molecular Systems Inc.注册的商标。
ABI PRISM® 是Applied Biosystems Inc.注册的商标。
【几点建议】
●保存
经确认该产品反复冻融 10 次对品质没有影响。
●将普通逆转录反应试剂合成的cDNA，无需纯化，用灭菌水等稀释后可直接添加到Realtime PCR反应液中。添加量不应超过总反应体系的10%。过量的添加会大大改变PCR反应缓冲液的组成，导致定量性降低。另外如果使用的某种市售的cDNA合成试剂盒不是专门针对荧光定量PCR 而设计的，那么添加的 cDNA 体积应小于总反应体系的10%。
【相关产品】
●Realtime PCR用cDNA合成试剂盒
| 品名 | Code No. | 包装 | 价格 | 保存温度 | 说明书下载 |
|---|---|---|---|---|---|
| ReverTra Ace® qPCR RT Kit | FSQ-101 | 200次份 × 1 (10μl反应体系) | RMB 1,500 | -20℃ |
|
| ReverTra Ace® qPCR RT Master Mix | FSQ-201 | 200次份 × 1 (10μl反应体系) | RMB 2,000 | -20℃ |
|
| ReverTra Ace® qPCR RT Master Mix with gDNA Remover | FSQ-301 | 200次份 × 1 (10μl反应体系) | RMB 2,800 | -20℃ |
|
| 购买人 | 会员级别 | 数量 | 属性 | 购买时间 |
|---|
