【产品名称】

        TOROIVD® 5G Polymerase

【产品简介】

    本产品是基于 Tth DNA聚合酶和 Taq DNA聚合酶经过“人工进化”改造的一款多功能PCR聚合酶。该酶采用抗体修饰实现热启动PCR，具有高扩增速度、高灵敏度及高抗抑制性优良特征。配合专配缓冲液系统，敏感度可达2-3copies/ 反应，广泛用于低拷贝DNA/RNA病毒检测、低丰度基因表达分析等用途。

【产品特征】

• 超高灵敏度

增强的5'-3'外切酶活性及高封闭效率的抗体双重作用，增强了检测的荧光信号值，使得敏感度可达2-3copies/反应。

• 高热稳定性

反应缓冲液中添加了独特的稳定剂，37℃孵育一周性能保持不变。方便进行运输、室温融化及加样。

• 高扩增速度

增强的5'-3'聚合酶活性，可进行高速qPCR或PCR检测。

• 高抗抑制能力

提高了该酶的抗抑制性，可对全血、血清、血浆及细胞组织进行简单裂解或直接扩增。

• 具有反转录活性

在Mn²⁺作用下的具有高温逆转录活性特性，仅单酶可实现1-Step RT-qPCR。

【产品内容】

< MFP-207-200U >

TOROIVD^® 5G Polymerase 200U/50μl

2×5G qPCR Buffer GB 1ml×2tube

< MFP-207-4KU >

TOROIVD^® 5G Polymerase 4KU/1ml

2×5G qPCR Buffer GB 40ml×1tube

【产品使用方法】

可选反应Buffer:

1. 抗抑制性DNA直接扩增Buffer:  ASF-101T 2×5G qPCR Buffer T 1ml/tube

uMg²⁺建议在反应终浓度2.5-8mM之间调整优化，可提高PCR直扩性能，敏感度可达50copies/反应。

2. 单酶一步法RNA扩增Buffer:

ASF-201R 2×5G RT-qPCR Buffer R 1ml/tube

ASF-Mn 50mM 醋酸锰 0.5ml/tube

DNA模板的qPCR扩增:

RNA模板的双酶1-Step法扩增:

RNA模板的单酶1-Step法扩增:

u不同公司酶体系对引物探针浓度要求不一样，若使得MFP-207发挥到最大性能，建议引物终浓度在0.2-0.8mM及探针在0.1-0.4mM之间进行调整优化。

【购买信息】

储存条件：-20℃储存试剂,使用前请室温避光熔解

【结果示例】

1.MFP-207与进口T品牌竞品扩增灵敏度对比

试剂：MFP-207和T公司高灵敏度酶

仪器：ABI 7500

模板：非洲猪瘟病毒B636L基因（编码VP72 蛋白）的质粒度模板

引物探针：世界动物卫生组织（OIE）提供

F：5'-CTGCTCATGGTATCAATCTTATCGA-3'

R：5'-GATACCACAAGATCRGCCGT-3'P：

5'-FAM-CCACGGGAGGAATACCAAC CCAGTG-TAMRA-3'

结果：可稳定检测3-4copies/反应非洲猪瘟病毒，具有极高的灵敏度。比进口T品牌高灵敏度酶在单拷贝浓度范围的具有更高的荧光值及更低的Ct值。

结果：QST-300在超高速PCR循环条件下仍然具有很高的线性范围，特别适合快速进行基因表达分析。

2. 使用MFP-207高速PCR检测非洲猪瘟病毒

（Biorad CFX96或杭州博日LineGene 9600 Plus）

结果：在不降低灵敏度的情况下，目前极短的变性及延伸时间大大缩短检测时间。不同定量PCR仪需要进行最佳循环条件摸索。配合高速PCR仪，可以将PCR控制在30min以内。

3. MFP-207的热稳定性测试

（使用ABI 7500）

实验：将MFP-207和Buffer进行37℃保存一周采用非洲 猪瘟病毒进行qPCR测试稳定热加速稳定性。

结果：MFP-207和Buffer进行37℃热加速一周，其性能保持不变，满足IVD诊断原料用途。