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TOROIVD® 5G Polymerase
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TOROIVD® 5G Polymerase

基于 Tth DNA聚合酶和 Taq DNA聚合酶经过“人工进化”改造的一款多功能PCR聚合酶,抗体法热启动


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商品描述

基于 Tth DNA聚合酶和 Taq DNA聚合酶经过“人工进化”改造的一款多功能PCR聚合酶,抗体法热启动



产品名称: TOROIVD® 5G Polymerase

产品简介:本产品是基于 Tth DNA聚合酶和 Taq DNA聚合酶经过“人工进化”改造的一款多功能PCR聚合酶。该酶采用抗体修饰实现热启动PCR,具有高扩增速度、高灵敏度及高抗抑制性优良特征。配合专配缓冲液系统,敏感度可达2-3copies/ 反应,广泛用于低拷贝DNA/RNA病毒检测、低丰度基因表达分析等用途。

产品特征:

超高灵敏度

增强的5'-3'外切酶活性及高封闭效率的抗体双重作用,增强了检测的荧光信号值,使得敏感度可达2-3copies/反应。

高热稳定性

反应缓冲液中添加了独特的稳定剂,37℃孵育一周性能保持不变。方便进行运输、室温融化及加样。

高扩增速度

增强的5'-3'聚合酶活性,可进行高速qPCRPCR检测。

高抗抑制能力

提高了该酶的抗抑制性,可对全血、血清、血浆及细胞组织进行简单裂解或直接扩增。

具有反转录活性

Mn2+作用下的具有高温逆转录活性特性,仅单酶可实现1-Step RT-qPCR

产品内容:

< MFP-207-200U >

TOROIVD® 5G Polymerase 200U/50μl

2×5G qPCR Buffer GB 1ml×2tube

< MFP-207-4KU >

TOROIVD® 5G Polymerase 4KU/1ml

2×5G qPCR Buffer GB 40ml×1tube

产品使用方法:

可选反应Buffer:

1. 抗抑制性DNA直接扩增Buffer:  ASF-101T 2×5G qPCR Buffer T 1ml/tube

Mg2+建议在反应终浓度2.5-8mM之间调整优化,可提高PCR直扩性能,敏感度可达50copies/反应。

2. 单酶一步法RNA扩增Buffer:

ASF-201R 2×5G RT-qPCR Buffer R 1ml/tube

ASF-Mn 50mM 醋酸锰 0.5ml/tube

DNA模板的qPCR扩增:

 

 

 

RNA模板的双酶1-Step法扩增:

 

 

RNA模板的单酶1-Step法扩增:

 

 

不同公司酶体系对引物探针浓度要求不一样,若使得MFP-207发挥到最大性能,建议引物终浓度在0.2-0.8mM及探针在0.1-0.4mM之间进行调整优化。

 购买信息:

 

货号

规格

目录价

备注

MFP-207-200U

200U/50μl

¥ 600

20μl体系×200

MFP-207-4KU

4KU/1ml

¥ 6,000

20μl体系×4000

 

 

储存条件:-20℃储存试剂,使用前请室温避光熔解

结果示例:

 

1. MFP-207与进口T品牌竞品扩增灵敏度对比

试剂:MFP-207T公司高灵敏度酶

仪器:ABI 7500

模板:非洲猪瘟病毒B636L基因(编码VP72 蛋白)的质粒度模板

引物探针:世界动物卫生组织(OIE)提供

F5'-CTGCTCATGGTATCAATCTTATCGA-3'

R5'-GATACCACAAGATCRGCCGT-3'P

5'-FAM-CCACGGGAGGAATACCAAC CCAGTG-TAMRA-3'

 

 

 

 

结果:可稳定检测3-4copies/反应非洲猪瘟病毒,具有极高的灵敏度。比进口T品牌高灵敏度酶在单拷贝浓度范围的具有更高的荧光值及更低的Ct值。

 

 

结果:QST-300在超高速PCR循环条件下仍然具有很高的线性范围,特别适合快速进行基因表达分析。

 

2. 使用MFP-207高速PCR检测非洲猪瘟病毒

Biorad CFX96或杭州博日LineGene 9600 Plus

 

 

 

结果:在不降低灵敏度的情况下,目前极短的变性及延伸时间大大缩短检测时间。不同定量PCR仪需要进行最佳循环条件摸索。配合高速PCR仪,可以将PCR控制在30min以内。

 

3. MFP-207的热稳定性测试

(使用ABI 7500

 

实验:将MFP-207Buffer进行37℃保存一周采用非洲 猪瘟病毒进行qPCR测试稳定热加速稳定性。

结果:MFP-207Buffer进行37℃热加速一周,其性能保持不变,满足IVD诊断原料用途。