【产品名称】

       Recombinant RNase Inhibitor

【产品简介】
  本产品是以大肠杆菌中进行表达，并通过亲和层析纯化的重组猪源RNase抑制剂，该蛋白特征与猪肝和人胎盘来源此类酶相似，可完全替代天然提取RNase Inhibitor的应用。本产品与RNase A形成1：1复合体，抑制RNase活性。该反应是可逆的，通过尿素及巯基类试剂能够解离复合体，使RNase复性而抑制剂不可逆失活。本产品与其它竞争性抑制剂（核酸类、无机磷酸类）不同，可以很容易地通过苯酚处理将其从反应体系中除去，但不能抑制逆转录酶的RNase H的活性。使用时可直接加入含有RNA的反应液中用于cDNA第一链合成、体外转录和体外翻译等实验。

【产品用途】

• cDNA合成

• 体外转录

• 体外翻译

• 1-Step RT-qPCR

【注意事项】

1.本产品在PH7～8 时表现最佳抑制RNase活性。

2. 本产品发挥活性作用至少添加1 mM的DTT。

3. 本产品不抑制RNase H活性及逆转录酶活性。

【产品内容】
< RIN-002-2KU >

Recombinant RNase Inhibitor 2KU/50μl

保存条件-20℃

储存Buffer：

20 mM HEPES-KOH（pH 7.6），50 mM KCl，8 mM DTT，50% glycerol

【产品使用方法】
1、长链cDNA合成

(1)在无RNA酶的PCR管中，配制RNA/引物预混液

(2) 65℃加热5min，立即置于冰上

(3) 轻轻混匀，按如下反应条件设置 42℃ 20-60min ；99℃ 5min

备注：–逆转录温度可在42℃-60℃之间调整，反应时间建议在20-60min内调整。

(4) 得到的cDNA溶液可以直接用于第二链cDNA合成或PCR扩增等

2、RNA模板的双酶1-Step法扩增

【购买信息】

【结果示例】

RIN-002抑制RNase A效果验证：

图a 20ul反应体系添加10ng RNase A及40U RNase抑制剂

图b 20ul反应体系添加10ng RNase A及不添加RNase抑制剂

        结果：图a显示，40U的RIN-002及 T 品牌RNase抑制剂的加入可以充分抑制10ng RNase A。同时体系中不加入RNase抑制剂，RNA会大量降解从而影响扩增。