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RNA稀释保存液
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RNA稀释保存液

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商品描述

RNA稀释保存液


产品简介    

                RNA Dilution&Storage Solution作为TE Buffer及无RNA酶水的替代物,能环境抑制RNA酶对RNA的降解,保使RNA保持更高的稳定性。在RNA提取的最后一步,需要使用TE Buffer及无RNA酶对沉淀RNA进行稀释保存,很难保证RNA的稳定性。本产品低pH值(7.0)及化学RNase抑制剂的双重作用使得RNA保持很高的稳定性,同时与市面的RNA Later等稳定剂相比,该产品不影响逆转录及PCR等下游实验的效果,是一种理想的RNA操作的稀释保存液。该本产品可用于各种常规RNA实验,如逆转录实验, RT-PCR, 一步法 RT-qPCR, 体外转录、RNA杂交等实验用途。

 

产品组成

      RNA Dilution&Storage Solution(RDB-100)包含100ml/瓶,如下:

组成

规格

数量

RNA Dilution&Storage Solution

100ml/

1

 

【储存条件】

请保存于2-8℃条件下。


产品用途

-RNA稀释

该产品不影响逆转录及PCR等下游实验的效果,可代替TE Buffer及无RNA酶水,用于各种常规RNA实验,如RNA提取、逆转录实验, RT-PCR, 一步法 RT-qPCR, 体外转录、RNA杂交等实验用途。

-RNA 保存

该产品作为TE Buffer及无RNA酶水替代品保存各种用途RNA,如纯化的RNA保存,诊断试剂盒的RNA阳性对照RNA的保存等。可保持更高的室温稳定性。


【应用数据】

稀释保存液:

A组: RNA Dilution&Storage Solution(TOROIVD,RDB-100)

B组:The RNA Storage Solution(Ambion,AM7001) 

RNA模板:  

将100μL0.8ng MS2RNA(Roche)分别加入2ml以上两种保存液中,充分混匀。均分装成两份在25℃ 和37℃金属浴上保存。

引物和探针:

上游引物: GCCTTAGCAGTGCCCTGTCT     终浓度:400nM
下游引物:AACATGCTCGAGGGCCTTA   终浓度:400nM

探针:FAM-CCCGTGGGATGCTCCTACATGTCA-TAMRA  终浓度:200nM

定量PCR试剂:

TOROIVD® Probe 1-step RT-qPCR 5G Kit 2.0 (TOROIVD,QPR-303UD)

定量PCR仪器:ABI-7500


实验结果:

1、稀释分装后起始RNA模板量的确认

如图示,采用两种RNA保存液稀释RNA后定量PCR的曲线几乎完全重合,说明稀释分装的四管RNA溶液的起始模板量相同,且对RT-qPCR结果无抑制。

 

 

2、两种保存液在25℃及37℃孵育三天稳定性比较

  如图所示,采用RNA Dilution&Storage Solution(TOROIVD,RDB-100),在25℃和37℃下孵育3天后Ct值保持一致(图中A1&A2),RNA保持稳定。

  采用The RNA Storage Solution(Ambion,AM7001)The RNA Storage Solution(Ambion,AM7001),在25℃孵育3天Ct值提高2.8左右,在25℃孵育3天Ct值提高8.3左右,说明RNA大量降解。

  故RNA Dilution&Storage Solution比The RNA Storage Solution具有更好的RNA保护效果。

 

 

 

常见问题

1、RBD-100能兼容RTQ系列和其它反转录试剂吗?

  答:不能直接用于RTQ系列和其它的稀释RNA使用,因为该试剂中含有10mM Tris-HCl缓冲液,容易会使得很多反转录试剂盒的pH发生变化,从而影响反转录效率。但是可以用该试剂稳定保存RNA,并且含该保存液的试剂不得高于去基因组或反转录体系的15%。也就是说,可以使用普通的PCR水稀释6倍以上使用,不影响使用效果。可以降低对无RNase水的依赖,也可降低对无RNase操作环境的依赖。

2、RBD-100可以直接用于1-Step RT-qPCR试剂吗?

答:由于绝大部分1-Step RT-qPCR试剂的pH值在8.0以上,且缓冲能力很强;所以可以用该保稀释保存液可以直接用于1-Step RT-qPCR,且不受RNA添加量的影响。也可代替DEPC水直接稀释RNA用于1-Step RT-qPCR的梯度稀释,制作标准曲线。