RNA稀释保存液
【产品简介】
RNA Dilution&Storage Solution作为TE Buffer及无RNA酶水的替代物,能环境抑制RNA酶对RNA的降解,保使RNA保持更高的稳定性。在RNA提取的最后一步,需要使用TE Buffer及无RNA酶对沉淀RNA进行稀释保存,很难保证RNA的稳定性。本产品低pH值(7.0)及化学RNase抑制剂的双重作用使得RNA保持很高的稳定性,同时与市面的RNA Later等稳定剂相比,该产品不影响逆转录及PCR等下游实验的效果,是一种理想的RNA操作的稀释保存液。该本产品可用于各种常规RNA实验,如逆转录实验, RT-PCR, 一步法 RT-qPCR, 体外转录、RNA杂交等实验用途。
【产品组成】
RNA Dilution&Storage Solution(RDB-100)包含100ml/瓶,如下:
组成 | 规格 | 数量 |
RNA Dilution&Storage Solution | 100ml/瓶 | 1瓶 |
【储存条件】
请保存于2-8℃条件下。
【产品用途】
-RNA稀释
该产品不影响逆转录及PCR等下游实验的效果,可代替TE Buffer及无RNA酶水,用于各种常规RNA实验,如RNA提取、逆转录实验, RT-PCR, 一步法 RT-qPCR, 体外转录、RNA杂交等实验用途。
-RNA 保存
该产品作为TE Buffer及无RNA酶水替代品保存各种用途RNA,如纯化的RNA保存,诊断试剂盒的RNA阳性对照RNA的保存等。可保持更高的室温稳定性。
【应用数据】
稀释保存液:
A组: RNA Dilution&Storage Solution(TOROIVD,RDB-100)
B组:The RNA Storage Solution(Ambion,AM7001)
RNA模板:
将100μL0.8ng MS2RNA(Roche)分别加入2ml以上两种保存液中,充分混匀。均分装成两份在25℃ 和37℃金属浴上保存。
引物和探针:
上游引物: GCCTTAGCAGTGCCCTGTCT 终浓度:400nM
下游引物:AACATGCTCGAGGGCCTTA 终浓度:400nM
探针:FAM-CCCGTGGGATGCTCCTACATGTCA-TAMRA 终浓度:200nM
定量PCR试剂:
TOROIVD® Probe 1-step RT-qPCR 5G Kit 2.0 (TOROIVD,QPR-303UD)
定量PCR仪器:ABI-7500
实验结果:
1、稀释分装后起始RNA模板量的确认
如图示,采用两种RNA保存液稀释RNA后定量PCR的曲线几乎完全重合,说明稀释分装的四管RNA溶液的起始模板量相同,且对RT-qPCR结果无抑制。
2、两种保存液在25℃及37℃孵育三天稳定性比较
如图所示,采用RNA Dilution&Storage Solution(TOROIVD,RDB-100),在25℃和37℃下孵育3天后Ct值保持一致(图中A1&A2),RNA保持稳定。
采用The RNA Storage Solution(Ambion,AM7001)The RNA Storage Solution(Ambion,AM7001),在25℃孵育3天Ct值提高2.8左右,在25℃孵育3天Ct值提高8.3左右,说明RNA大量降解。
故RNA Dilution&Storage Solution比The RNA Storage Solution具有更好的RNA保护效果。
【常见问题】
1、RBD-100能兼容RTQ系列和其它反转录试剂吗?
答:不能直接用于RTQ系列和其它的稀释RNA使用,因为该试剂中含有10mM Tris-HCl缓冲液,容易会使得很多反转录试剂盒的pH发生变化,从而影响反转录效率。但是可以用该试剂稳定保存RNA,并且含该保存液的试剂不得高于去基因组或反转录体系的15%。也就是说,可以使用普通的PCR水稀释6倍以上使用,不影响使用效果。可以降低对无RNase水的依赖,也可降低对无RNase操作环境的依赖。
2、RBD-100可以直接用于1-Step RT-qPCR试剂吗?
答:由于绝大部分1-Step RT-qPCR试剂的pH值在8.0以上,且缓冲能力很强;所以可以用该保稀释保存液可以直接用于1-Step RT-qPCR,且不受RNA添加量的影响。也可代替DEPC水直接稀释RNA用于1-Step RT-qPCR的梯度稀释,制作标准曲线。
购买人 | 会员级别 | 数量 | 属性 | 购买时间 |
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