单酶一步法qRT-PCR试剂盒
探针法One Step qRT-PCR Kit
RNA-direct Realtime PCR Master Mix 【说明书下载】
单酶・一步法 迅速・高性能的探针法Realtime PCR用试剂。
本产品是利用Tth DNA polymerase在Mn2+存在条件下显示强逆转录活性的特性开发的『单酶・一步法』Realtime PCR用2×Master Mix。与在同一反应体系内使用RTase和Taq DNA polymarase的『双酶・一步法』试剂相比,由于用单酶反应更容易设定最佳条件,因此能进行高效率的分析。此外,逆转录反应与PCR在同一离心管内进行,非常适合于高通量反应。
Tth DNA polymerase适用于容易形成高级结构的RNA和高GC含量目的片段。同时采用了使用抗体的热启动法,能实现高特异性。
以cDNA为模板的Taq Base高效率Realtime PCR产品点击这里阅览详细。
【产品特征】
特征1 高性能、高通量
本产品是逆转录反应与PCR在同一反应体系内连续进行的『单酶・一步法』试剂,与使用RTase和Taq的『双酶・一步法』相比,更适合用于高通量反应。
特征2 可用于难扩增序列
由于该试剂盒可在高温下进行逆转录反应,因此可以应用于易形成高级结构的模板RNA检测。而且因为Tth DNA polymerase对GC-rich的序列扩增有效,因此也适用于高GC含量目的片段。
特征3 高特异性
采用了使用抗体的热启动,可抑制非特异性反应。
特征4 高通用性(可用于各种仪器)
适用于通用PCR离心管(微孔板)及使用Glass Capillary型的Realtime PCR仪。此外,本试剂已预混了Passive Reference染料,可用于需要校正荧光信号的仪器。
※本公司用本试剂做过实验的仪器请点击这里。
【产品实验例】
实验例1 TaqMan® Probe Assay性能的比较
RNA-direct VS 双酶・一步法(仪器:博日科技
以mRNA为模板,与A公司的Taq+RTase混合型酶(双酶・一步法)进行比较实验。以人培养细胞来源的mRNA(10n倍稀释系列(n=2))为模板,通过TaqMan® Probe Assay进行β actin mRNA检测(按100稀释的反应液20μl中含5ng的Poly(A)+ RNA稀释)。A公司试剂按其使用说明书推荐的反应条件。
结果可见,用RNA-direct Realtime PCR Master Mix起峰早、线性好。
【简要备注】
●关于保存
长期不使用时建议在−20℃条件下(避光)保存。短时间内需持续使用时,可于融解后在4℃(避光)保存,并于三周内使用完毕。
●关于引物设计
请参照这里。
●关于逆转录反应时的引物
PCR用的Reverse Primer可直接作为逆转录引物使用,无需另外添加。
不能使用Oligo dT、Random Primer。
●关于样品的添加量
在10μl等反应体积较小的情况下,样品请勿按1μl的量添加,而应稀释成2μl后再添加,这样可以控制加样过程中产生的误差,从而得到较好的结果。
●关于Passive Reference染料
已预混在产品里面。可直接用于需要校正荧光信号的仪器。对无需使用Passive Reference的PCR仪器不会产生影响。
●关于锰溶液
RNA-direct Realtime PCR系列产品中,按反应所需量另外单独添附了醋酸锰溶液(橙色标签)。
【参考文献】
Biochemistry, 30, : 7661-7666 (1991)
价格表
<点击品名可下载使用说明书。>
品名 | 包装* | 保存 温度 | Code No. | 价格 |
One-step qPCR Kit | - | - | - | - |
100次用 (500µl×5) | -20℃ | QRT-101 | RMB 2,000 | |
500次用 (500µl×5)×5 | -20℃ | QRT-101B | RMB 9,200 |
*反应体系为50μl时的使用次数。
购买人 | 会员级别 | 数量 | 属性 | 购买时间 |
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