【产品简介】

  TOROGreen® qPCR Master Mix是TOROIVD经典定量PCR试剂盒，是基于SYBR Green I染料法的 2×预混液，包含除引物和模板外的所有组分。本产品采用抗体法热启动的Taq酶，可进行高特异、高稳定的定量PCR分析。该酶通过特殊配方优化，可在37℃下7天性能保持不变，可室温加样操作，具有很高的稳定性。该试剂中已预混ROX,可兼容绝大部分定量PCR仪。该产品已经在中国科学院、复旦大学、浙江大学等高校研究所大量使用，具有良好的市场口碑。

【产品组成】

  TOROGreen® qPCR Master Mix（QST-100）采用20μL 反应体系可使用 1000 次。主要成分如下：

【储存条件】

 所有组分请均保存于-20℃条件下。短期使用，请在2-8℃条件下保存。

【体系配制】

   1.试剂盒使用前请室温避光完全融化，并离心后使用。

   2.按照如下两种情况进行布板及总管分装加样设计。

 基因最大化布板和加样设计

 样品最大化布板和加样设计

3.以上反应体系直接离心后上机。

【循环条件】

    采用两步法循环条件，兼容所有定量PCR仪：

【应用数据】

目的基因：AMDH基因质粒

上游引物：AGGAAGCCGATGTGTTCGTT

下游引物：TTCCGCTTGCTGGTACACTT

1.具有高热稳定性、扩增效率及宽线性范围

结论：QST-100具有宽线性范围，特别适合用于相对定量法做基因表达分析，如绿色所示。经37℃加热孵育7天后，性能几乎无变化，如蓝色线所示。扩增效率均保持95%以上。

2.具有高特异性及更低的解链温度

     结论：与进口T品牌熔解曲线对比：二者均具有很高的特异性，均满足MIQE要求。与中国N品牌熔解曲线对比：QST-100具有很高特异性，满足MIQE要求；N品牌特异性差，低丰度基因容易产生引物二聚体，不能满足MIQE要求。Tm值QST-100 =81.5＜N品牌=84.5＜T品牌=87.5 ，该差异说明配方的差异性；Tm值越低，解链温度越低，越利于高GC含量片段扩增。QST-100适合高GC含量片段的扩增。

【相关推荐】

   基因表达分析时推荐使用含去基因组功能的反转录试剂盒RTQ-201：

【用户案例】

实验例1：用QST-100对巨噬细胞GAPDH基因进行定量PCR扩增

实验例2：用QST-100对人胰腺癌细胞对Prex1和GAPDH基因进行定量PCR扩增

实验例3：用QST-100对人肿瘤细胞对Actin和PD-L1基因进行定量PCR扩增

实验例4：用QST-100对番茄过表达植株进行定量PCR分析

实验例5：用QST-100对烟草基因沉默（VIGS）植株进行定量PCR分析

实验例6：用QST-100对菜蛾盘绒茧蜂组织进行定量PCR分析

实验例7：用QST-100对果蝇组织进行定量PCR分析

实验例8：用QST-100对RAG(小鼠肾腺癌细胞)IL4I1基因进行定量PCR扩增

实验例9：用QST-100对HUVEC/MCF-7/A549细胞GAPDH/CD31/CD144基因进行定量PCR扩增

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