热启动用抗Taq抗体

anti-Taq high

【产品特点】

特征1　高性能

采用了可确保抑制PCR反应前常温下的聚合酶活性（45℃事可达95%以上）的高活性抗体。
特征2　简便
与已有的Taq DNA polymerase混合即可，非常简便。且可用于Taq Base的Long PCR用酶。

【实验例】

1. 以人基因组DNA为模板的PCR例

以β-globin cluster内的3.6kb为目的片段，使用A公司生产的Long PCR用酶、anti-Taq high、B公司生产的热启动用抗体进行PCR。结果显示，仅用A公司的酶无法确认到条带，而使用anti-Taq high进行热启动PCR则可确认到条带。此外，使用anti-Taq high比使用B公司抗体可获得更好的结果。
由此可见，anti-Taq high对以Taq DNA polymerase为基础的Long PCR用酶进行热启动的效果要比其他抗体好。
 

【简要备注】

PCR反应的问题在于进入PCR循环之前的升温过程中，会发生引物与模板DNA形成非特异性双链杂交体，或引物之间形成引物二聚体的现象。这些都是产生杂带和引物二聚体的原因。热启动PCR对这些副作用进行了回避，是一种提高目的片段扩增效果的有效的方法。其中，使用抗体，在常温阶段抑制聚合酶活性的热启动法具有很大的优点。本产品使用的抗Taq抗体，在70℃以下时会与Taq DNA polymerase相结合，抑制其活性。因此如果采用事先与该抗体结合的Taq DNA Polymerase，则可以防止在PCR反应的第一循环中的非特异性反应的发生。本抗体在70℃以上可迅速失活，不会对之后的Taq DNA polymerase反应产生影响。使用抗体的热启动法，与化学修饰热启动法不同，无需长时间的变性步骤，具有在第一循环的变性步骤中即可完全失活的优点。

【相关信息】

●纯度：

已通过PCR确认，没有Mouse基因组的污染。
●适用于以Taq DNA polymerase为基础的Long PCR用酶：
本抗体可用于以Taq DNA polymerase为基础的长片段・高效率用PCR酶。
●基本反应条件
Taq DNA polymerase     1U
anti-Taq high         0.2μl
or
Taq DNA polymerase  (5U/μl)
+ 等量的anti-Taq high                    
↓
室温、5min

【参考文献】

1）D'Aquila,R.T. et al.,Nucl.Acids. Res.,19:3749(1991)
2）Chou,Q. et al.,Nucl.Acids.Res.,20:1717(1992)
3）Kellogg,D.E. et al.,BioTechniqus,16:1134(1994)

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